原理
材料与仪器
HEPES结合缓冲液
步骤
1) 按基本方案步骤1〜15进行。
2) 将平皿在4℃冷却10 min。用针扎孔标记各膜的位置。小心地揭起膜,室温下在空气中瞭干15 min。
3) 将膜浸于HEPES结合缓冲液/6 mol/L盐酸狐中,4℃轻轻摇动温育10 min。在新 鲜的HEPES结合缓冲液/6 mol/L盐酸胍中重复1次。
4) 将膜浸于HEPES结合缓冲液/3 mol/L盐酸胍(每10张膜50 mL)中,4℃ 5 min。 重复4次。每次用HEPES缓冲液及浓度较前次减半的盐酸胍进行漂洗。
5) 将膜浸于HEPES缓冲液(50 mL/10张膜)中,4℃ 5 min。用新鲜缓冲液重复洗1次。
6) 在BLOTTO中温育封闭。
7) 进行滤膜筛选。
来源:丁香实验