丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册
点赞
收藏
wx-share
分享

用盐酸胍进行干燥膜的变性/复性循环

相关实验:编码 DNA 结合蛋白的 cDNA 克隆的检测、纯化和鉴定

最新修订时间:

原理


材料与仪器

HEPES结合缓冲液

步骤

1) 按基本方案步骤1〜15进行。


2) 将平皿在4℃冷却10 min。用针扎孔标记各膜的位置。小心地揭起膜,室温下在空气中瞭干15 min。


3) 将膜浸于HEPES结合缓冲液/6 mol/L盐酸狐中,4℃轻轻摇动温育10 min。在新 鲜的HEPES结合缓冲液/6 mol/L盐酸胍中重复1次。


4) 将膜浸于HEPES结合缓冲液/3 mol/L盐酸胍(每10张膜50 mL)中,4℃ 5 min。 重复4次。每次用HEPES缓冲液及浓度较前次减半的盐酸胍进行漂洗。


5) 将膜浸于HEPES缓冲液(50 mL/10张膜)中,4℃ 5 min。用新鲜缓冲液重复洗1次。


6) 在BLOTTO中温育封闭。


7) 进行滤膜筛选。

来源:丁香实验

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序