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    技术和方案20 对数生长

    相关实验：酵母遗传学方法实验

    最新修订时间：

    材料与仪器

    步骤

    研究人员经常希望能够操作处于各种生长时期的酵母细胞，收集处于对数生长期的 细胞而非处于生长平台期的细胞就显得十分必要。 酵母细胞在一段时间会对数生长，而 处于平台期的细胞不会同步进入细胞周期，除非处于精密控制的生长状态。因此，有时 候很难保证培养的细胞正常分布于细胞周期，常常有必要在前一天培养酵母，以保证在 你使用时它们能够处于正确的生长时期。 群体细胞的对数生长可以用数学式来表示 JV=iV0e _ 2 ) 式中， iv 代表某一时刻每毫升培养物中的细胞数； JV。代表起始时刻每毫升培养物中的 细胞数； Z代表培养时间；&代表倍增时间。 野生型酵母细胞在YPD培养基中生长至平台期时，细胞密度可达到2X 108 个/m l， 而在SC或 H C 培养基中生长至平台期细胞密度可达到2X 107 个/m l。 倍增时间在23°C时大约是2h， 30°C时 是 1. 5h ， 36°C时是lh 。 【例】现在是下午5 时整，想在明日上午9 时开始实验， 酵母细胞在30°C培养，密 度达到1X 107 个/m l。现 有 5m l在 Y P D 中培养至饱和的酵母培养液，需要怎样稀释培 养物使它在明日早晨达到合适的密度？ N = 1X107 t— 16h 右2= 1 . 5 h 1X 107= N 〇 eln2(16/1-5 ) l X 1 0 7= N 〇 e(0-69)(10-7) N 〇 =lX 107/1608 计 算 得 出 6218,即所需的起始密度值是6. 2 X 103 个/m l。 稀释细胞的倍数是2X 108/6218= 3. 2X 104 因此，将饱和培养物稀释3.2 X 104 倍可以使起始密度达6.2 X 103 个/m l。对 于 50ml (50 000^1)培养基，需 要 1 . 6 4 的饱和培养物（50 000/32 000=1. 6)。

    来源：丁香实验

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