材料与仪器
磁珠
Dynabead M-280链霉抗生物素
磁设备
Dynabead M-280链霉抗生物素
磁设备
步骤
实验方案 A
- 振荡 lmin 以使 Dynabead M-280 链霉抗生物素重新成为混悬液。
- 将 2X 的 100 ul Dynabeads 转移至 U—个 1.5 ml 的 Eppendorf 试管中。
- 用磁设备固定磁珠,移去上清液。
- 用 200 ul 的 IX 结合及冲洗缓冲液重悬磁珠冲洗 3 次,固定磁珠,移去冲洗液。
- 将 NlaIII 酶消化后的 cDNA 分成两份各 10ul,每份中加入 90ul 的重蒸水和 100ul 的 2X 结合及冲洗缓冲液;混合后加入一份冲洗过的磁珠。
- 混合后,在室温下 W 育 30 min(每 IOmin 混合 1 次)。
- 用磁设备固定磁珠,弃去上清液。
- 用 200ul 的 IX 结合及冲洗缓冲液冲洗固定的磁珠 3 次,然后再用 200ul 的 LoTE 冲洗 1 次。
- 在冲洗完最后 1 次后,固定磁珠并移去 LoTE。
- 继续进行第 5 步
来源:丁香实验