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分级分离桥粒

相关实验:桥粒的制备实验

最新修订时间:

材料与仪器

桥粒
尿素溶液
匀浆器

步骤

1. 在最终的桥粒沉淀中加 20 ml 尿素溶液,用玻璃/Teflon 匀浆器匀浆,用尿素溶液稀释匀浆物使蛋白质浓度为 0.15 mg/ml,用 1 mol/L 的 Tris-HCl 调节溶液的 pH 值到 9.0 在室温至少搅拌 1 小时。

尿素溶液:

10 mmol/L Tris-HCl ( pH 9.0)

9 mol/L 尿素

0.2% β-巯基乙醇

5 μg/ml 亮抑蛋白酶肽

5 μg/ml 抑胃酶肽    

1 mmol/L PMSF

2. 100000 g 20℃ 超离心 60 分钟。

来源:丁香实验

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