植物凝集素亲和层析

TBS
植物凝集素柱

1. 在含有 Ca²⁺、Mg²⁺ 的 TBS 中平衡植物凝集素亲和介质，用至少 20 个柱体积清洗。

2. 在 5 ml —次性塑料吸管或注射器中制备 1 ml 植物凝集素柱。

3. 以缓慢流速（小于 0.25 ml/min）将蛋白样本上柱，回收所有过柱子的流过液。

4. 用 TBS 开始洗柱子，对于 1 ml 柱床体积的柱子，以 1 ml 1份收集流出液， 共收集 10 个 1 ml 流分。

5. 用溶解在 TBS 中的半抗原开始洗脱，对 10 个柱体积来讲，收集 1 个柱体积 1 份的流出液。

6. 如果必要，在 SDS-PAGE 电泳和检测前，用 TCA/DOC 沉淀来浓缩蛋白。