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植物凝集素亲和层析

相关实验:蛋白质糖基化的检测实验

最新修订时间:

材料与仪器

TBS
植物凝集素柱

步骤

1. 在含有 Ca2+、Mg2+ 的 TBS 中平衡植物凝集素亲和介质,用至少 20 个柱体积清洗。

2. 在 5 ml —次性塑料吸管或注射器中制备 1 ml 植物凝集素柱。

3. 以缓慢流速(小于 0.25 ml/min)将蛋白样本上柱,回收所有过柱子的流过液。

4. 用 TBS 开始洗柱子,对于 1 ml 柱床体积的柱子,以 1 ml 1份收集流出液, 共收集 10 个 1 ml 流分。

5. 用溶解在 TBS 中的半抗原开始洗脱,对 10 个柱体积来讲,收集 1 个柱体积 1 份的流出液。

6. 如果必要,在 SDS-PAGE 电泳和检测前,用 TCA/DOC 沉淀来浓缩蛋白。

来源:丁香实验

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