材料与仪器
细胞
甲基甲硫氨酸
SDS-PAGE
甲基甲硫氨酸
SDS-PAGE
步骤
1. 用 100 μCi/ml 的 [3H] 甲基甲硫氨酸标记细胞(约 1X107)。
2. 用放射免疫沉淀和 SDS-PAGE 分离目的蛋白。
3. 荧光光谱法观察,切下蛋白带,放在一个 0.5 ml 的微型离心管中。
4. 加 100 μl 的蒸馏水,当凝胶片膨胀时,去掉纸支持物。
5. 加 200 μl 的 1 mol/L NaOH 到含有凝胶片的试管中。
6. 立即将试管放到闪烁瓶中,用部分闪烁液填充(在 20 ml 小瓶中加 2.5 ml 即可),拧紧螺帽。
7. 37℃ 保温 24 小时。
8. 从小瓶中取出试管,再加 7.5 ml 闪烁液,计数样本的放射性。
2. 用放射免疫沉淀和 SDS-PAGE 分离目的蛋白。
3. 荧光光谱法观察,切下蛋白带,放在一个 0.5 ml 的微型离心管中。
4. 加 100 μl 的蒸馏水,当凝胶片膨胀时,去掉纸支持物。
5. 加 200 μl 的 1 mol/L NaOH 到含有凝胶片的试管中。
6. 立即将试管放到闪烁瓶中,用部分闪烁液填充(在 20 ml 小瓶中加 2.5 ml 即可),拧紧螺帽。
7. 37℃ 保温 24 小时。
8. 从小瓶中取出试管,再加 7.5 ml 闪烁液,计数样本的放射性。
来源:丁香实验