最新修订时间:
简介
来源:丁香实验
操作方法
1. SDS-PAGE 和电洗脱分离目的蛋白。 2. 洗脱的蛋白中加牛血清白蛋白载体使最终浓度为 0.1 mg/ml,并用 5 倍体积的含 1.5% 氢氧化氨的冰冷丙酮处理 30 分钟以沉淀蛋白。 3. 离心收集沉淀蛋白,倒掉上清,在真空下干躁沉淀物。 4. 在 0.4 ml 的乙醇:甲酸(4:1 ) 溶液中重悬蛋白,并转到一个带玻璃螺丝帽的试管中。 5. 加 0.1 ml 的拉尼镍混
羧基甲基化的证实1. 用 100 μCi/ml 的 [3H] 甲基甲硫氨酸标记细胞(约 1X107)。 2. 用放射免疫沉淀和 SDS-PAGE 分离目的蛋白。 3. 荧光光谱法观察,切下蛋白带,放在一个 0.5 ml 的微型离心管中。 4. 加 100 μl 的蒸馏水,当凝胶片膨胀时,去掉纸支持物。 5. 加 200 μl 的 1 mol/L NaOH 到含有凝胶片的试管中。 6. 立即将试管放到闪烁