材料与仪器
甲醇（50% 和5%v v) 二硫苏糖醇 AgNO3 柠檬酸（固态) 显影液
步骤
试剂
甲醇（50% 和5%v/v)
10umol/L二硫苏糖醇（DTT)
AgNO3(0.1%w/v)
柠檬酸（固态)
显影液
操作程序
此操作程序是根据Merril(1987)的方法修改而成。室温下，凝胶在旋转平台上缓慢摇动，并进行下列步骤。
1)在50% 甲醇溶液中浸泡2次，每次15 min。
2)在5% 甲醇溶液中浸泡10 min。
3)用H2O迅速洗3次。
4)在10umol/L DTT溶液中浸泡20 min。
5)在0.1%AgNO3溶液中浸泡20min。
6)先用H20快速洗1次，然后用显影液洗2次，每次不超过15s。
7)在显影液中浸泡数分钟，直至显现蛋白质带。
8)加入固体柠檬酸（双水合物）（每200 ml显影液加约10 g柠檬酸)，停止显影。
9)用铝箔盖住凝胶（使避光)，继续浸泡10 min。
10)用H2O彻底清洗。凝胶在铝箔下（在暗处）H2O中浸泡10 min。再置（暗室）H20中过夜，使蛋白质条带显色。
如需要，凝胶可在4% 甘油中浸泡>lh，然后干燥。
甲醇（50% 和5%v/v)
10umol/L二硫苏糖醇（DTT)
AgNO3(0.1%w/v)
柠檬酸（固态)
显影液
操作程序
此操作程序是根据Merril(1987)的方法修改而成。室温下，凝胶在旋转平台上缓慢摇动，并进行下列步骤。
1)在50% 甲醇溶液中浸泡2次，每次15 min。
2)在5% 甲醇溶液中浸泡10 min。
3)用H2O迅速洗3次。
4)在10umol/L DTT溶液中浸泡20 min。
5)在0.1%AgNO3溶液中浸泡20min。
6)先用H20快速洗1次，然后用显影液洗2次，每次不超过15s。
7)在显影液中浸泡数分钟，直至显现蛋白质带。
8)加入固体柠檬酸（双水合物）（每200 ml显影液加约10 g柠檬酸)，停止显影。
9)用铝箔盖住凝胶（使避光)，继续浸泡10 min。
10)用H2O彻底清洗。凝胶在铝箔下（在暗处）H2O中浸泡10 min。再置（暗室）H20中过夜，使蛋白质条带显色。
如需要，凝胶可在4% 甘油中浸泡>lh，然后干燥。
来源：丁香实验
