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等电聚焦(固相pH梯度等电聚焦实验)

相关实验:固相 pH 梯度等电聚焦实验

最新修订时间:

材料与仪器

丙烯酰胺单体贮液 过硫酸铵贮液

步骤

打开循环水浴,设置冷却温度,一般为 10℃。

将制好的固相 pH 梯度凝胶铺在冷却板上,注意正负极。其间涂以液体石蜡或煤油,避免气泡陷入,以保证胶板和冷却板之间的良好接触。

用合适的电极溶液(参见表 7.7) 润湿滤纸电极条,分别放置凝胶的酸、碱侧。有的仪器采用粗电极与凝胶直接接触,不需加电极条。



按冷却板上的格子和预先设计的实验计划将样品加在凝胶上。微量样品可直接滴加,稀样品加在滤纸块上或小槽中。固相 pH 梯度等电聚焦与载体两性电解质等电聚焦的样品处理方法相似,只是前者 pH 梯度已在凝胶中固定,所以样品中的盐对梯度影响不大,但过高的盐浓度也会造成凝胶电导的降低而烧胶或使谱带畸变。

将白金电极丝分别放在滤纸电极条的中心,再将阳极和阴极分别与电源的正、负极相连。接通电源,电参数参见表 7.8。



来源:丁香实验

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