方案22.2 染料摄取法测定细胞生存力实验

细胞悬液用碘化丙啶和二乙酰荧光素的混合液染色，用荧光显微镜或流式细胞仪检测。

材料

无菌

单细胞悬液
双醋酸荧光素，10ug/ml，溶于 HBSS
碘化丙啶，500ug/ml

非灭菌

荧光显微镜
滤光片
荧光素：激发 450/590 nm ，发射 LP 515 nm
碘化丙啶：激发 488nm ，发射 615 nm

操作步骤

1. 细胞悬液的制备与染料排斥法相同（见方案 22.1)，但是生长液中不含酚红。
2. 以 1 : 10 的比例加入荧光素染料混合液，二乙酰荧光素的终浓度为 l ug/ml，碘化丙啶的终浓度为 50ug/ml。 :
3. 将细胞置于 37°C , 温育 10 min。
4. 将一滴细胞滴在载玻片上，盖上盖玻片，用荧光显微镜观察。