原理
血清中镁,镉离子在碱性溶液中段与甲基麝香草酚蓝染色结合,呈或蓝紫色化合物加人EGTA可掩盖离子的干扰。
材料与仪器
步骤
一、 实验试剂:
1. 碱性缓冲液:称取无水亚硫酸钠2g,叠氮钠100mg,甘氨酸750mg和乙二醇-双-(2-氨基乙醚)四乙酸 [Ethylene glycol-bis(2-aminoethyl ether)-N,N,N',N'-tetrazcetic acid 简称:EGTA] 90mg于小烧坏中,加lmol/L氢氧化钠 23ml使其溶解,转入100ml容量瓶中,加去离子水至刻度。
2. 显色剂:精确称取甲基麝香草酚蓝(AR)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.6g于烧坏中,加1mol/L盐酸溶液10ml,使其溶解后转入100ml容量瓶中,加去离子水至刻度,混匀,置棕色中保存。
3. 显色应用液:临用前将上述1液和2液等量混合即可。
4. 镁标准液:(2mg/dL)
二、实验操作:取经稀盐酸处理的去离子水清洗的干燥试管3支,标明测定标准和空白管,然后按表进行操作:
混匀,用分光光度计600nm波长,10mm比色杯,以空白管调零读取各管光密度值。
三、计算:
血清镁mmol/L=测定管吸光度/标准管吸光度×0.823
参考值:0.67-l.04mmol/L
1. 碱性缓冲液:称取无水亚硫酸钠2g,叠氮钠100mg,甘氨酸750mg和乙二醇-双-(2-氨基乙醚)四乙酸 [Ethylene glycol-bis(2-aminoethyl ether)-N,N,N',N'-tetrazcetic acid 简称:EGTA] 90mg于小烧坏中,加lmol/L氢氧化钠 23ml使其溶解,转入100ml容量瓶中,加去离子水至刻度。
2. 显色剂:精确称取甲基麝香草酚蓝(AR)和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)0.6g于烧坏中,加1mol/L盐酸溶液10ml,使其溶解后转入100ml容量瓶中,加去离子水至刻度,混匀,置棕色中保存。
3. 显色应用液:临用前将上述1液和2液等量混合即可。
4. 镁标准液:(2mg/dL)
二、实验操作:取经稀盐酸处理的去离子水清洗的干燥试管3支,标明测定标准和空白管,然后按表进行操作:
混匀,用分光光度计600nm波长,10mm比色杯,以空白管调零读取各管光密度值。
三、计算:
血清镁mmol/L=测定管吸光度/标准管吸光度×0.823
参考值:0.67-l.04mmol/L
注意事项
1. 溶血标本对本测定有干扰,故应避免。
2. EGTA是一个金属络合剂,在碱性条件下能结合镁而不结合镁,但浓度过高也能络合镁,故称量必须准确。
2. EGTA是一个金属络合剂,在碱性条件下能结合镁而不结合镁,但浓度过高也能络合镁,故称量必须准确。
来源:丁香实验