原理
抗人球蛋白试验（coomb’s）分为直接试验（直接反应）和间接试验（间接反应）。直接试验的目的是检查红细胞表面的不完全抗体，表面附有相应抗原的红细胞与不完全抗体结合之后称为致敏红细胞．经盐水洗涤过的致敏红细胞在盐水介质中不发生凝集，加入抗人球蛋白血清后则出现凝集，此即抗人球蛋白直接试验阳性。
材料与仪器
步骤
方法一：
1. 受检红细胞：取患者全血脱纤维蛋白（不可用抗凝血，因抗凝血可使阳性变阴性），然后用生理盐水洗涤红细胞3次，配成10％红细胞悬液．
2. 将抗人球蛋白血清（coomb’s血清）原液（己稀释4倍保存的血清）及生理盐水稀释成 1:2、1:4、1:8、1:16……等倍数之血清，分别加入凹玻片内各一滴。
3. 加入等量患者10％红细胞悬液混匀，置室温，15分钟，观察有无凝集以最高血清稀释倍数之阳性结果报告之。
方法二：
1. 取3支试管按下表操作：
２. 将2. 3管置37℃1小时，然后3管均用大量生理盐水洗三次，配成10%红细胞悬液。
３. 取小试管四支，按表操作：
4. 混匀后．置室温3O分钟，观察结果，也可低速离心后观察．
5. 结果：
若阳性对照凝集，盐水对照及阴性对照均无凝集表示操作及试剂均无问题，然后观察受检管报告之．
1. 受检红细胞：取患者全血脱纤维蛋白（不可用抗凝血，因抗凝血可使阳性变阴性），然后用生理盐水洗涤红细胞3次，配成10％红细胞悬液．
2. 将抗人球蛋白血清（coomb’s血清）原液（己稀释4倍保存的血清）及生理盐水稀释成 1:2、1:4、1:8、1:16……等倍数之血清，分别加入凹玻片内各一滴。
3. 加入等量患者10％红细胞悬液混匀，置室温，15分钟，观察有无凝集以最高血清稀释倍数之阳性结果报告之。
方法二：
1. 取3支试管按下表操作：
２. 将2. 3管置37℃1小时，然后3管均用大量生理盐水洗三次，配成10%红细胞悬液。
３. 取小试管四支，按表操作：
4. 混匀后．置室温3O分钟，观察结果，也可低速离心后观察．
5. 结果：
若阳性对照凝集，盐水对照及阴性对照均无凝集表示操作及试剂均无问题，然后观察受检管报告之．
注意事项
1. 抗人球蛋白血清在制好后，需用阳性红血球或致敏的Rh阳性“O”型红血球鉴定，为阳性者方可使用。为此不必每次作试验时作阳性，阴性对照．
2. 作试验时，在未知coomb’s血清前即发现红细胞凝集，此多为冷凝集现象，此时应在37℃环境下作试验，以排除冷抗体的存在．
3. 洗涤红细胞时，需用多量生理盐水洗三次，以使血清蛋白充分洗净才可排除其抑制阳性结果的因素．
4. 自身免疫抗体分为二种，一为温抗体，为IgG在室温及37℃起反应。一为冷抗体，为IgM在0－4℃起反应．因此，必需按照温度环境来作试验．
2. 作试验时，在未知coomb’s血清前即发现红细胞凝集，此多为冷凝集现象，此时应在37℃环境下作试验，以排除冷抗体的存在．
3. 洗涤红细胞时，需用多量生理盐水洗三次，以使血清蛋白充分洗净才可排除其抑制阳性结果的因素．
4. 自身免疫抗体分为二种，一为温抗体，为IgG在室温及37℃起反应。一为冷抗体，为IgM在0－4℃起反应．因此，必需按照温度环境来作试验．
来源：丁香实验
