植物细胞渗透势的测定

植物细胞的渗透势主要取决于液泡的溶质浓度，一些植物在细胞内主动积累溶质，以降低其渗透势，增加吸水能力。本实验主要了解植物体内不同组织和细胞之间、植物与环境之间水分的转移与植物组织渗透势的关系，学习质壁分离法测定植物组织渗透势的基本方法。

植物细胞渗透势的测定的基本原理是将植物组织放入一系列不同浓度的蔗糖或甘露醇溶液中，经过一定的时间达到渗透平衡后，细胞在其中发生初始质壁分离的溶液渗透势即等于细胞液的渗透势，此溶液称为等渗溶液，其浓度称为等渗浓度。实际测定时，初始质壁分离状态难以在显微镜下直接观察到，一般根据引起初始质壁分离的溶液浓度与相邻的不引起质壁分离的溶液浓度的平均值，求出等渗浓度，并计算出此溶液的渗透势，即为细胞的渗透势。

材料：

洋葱鳞茎、紫鸭趾草叶片等。

试剂：

1.00 mol・kg^-1 蔗糖溶液或甘露醇溶液。

器材：

①显微镜

②载玻片

③盖玻片

④温度计

⑤尖头镶子

⑥刀片

⑦移液管

⑧培养皿

⑨试剂瓶

⑩烧杯

⑪容量瓶

⑫量筒

⑬吸管

⑭吸水纸

1. 取干燥、洁净的培养皿 9 套编号，以 1.00 mol・kg^-1 的蔗糖溶液为母液，用蒸馅水稀释成 0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50、0.55、0.60 mol・kg，溶液，摇匀后备用。

2. 用刀片在洋葱鳞茎内表皮上划出大小为 0.5 cm X 0.5 cm 的小方格，用儀子剥取表皮（注意撕下表皮的厚度要适当）。立即投入不同浓度的蔗糖溶液中（由高浓度向低浓度），每一浓度放入 4~5 片表皮块，使表皮完全浸入溶液。

3. 表皮在蔗糖溶液中浸泡 15~20 min 后，从最高浓度的蔗糖溶液开始・按原来放入的顺序取出表皮，在载玻片上滴 1〜2 滴相应浓度的蔗糖溶液。加盖玻片，在显微镜下观察 5 个以上视野，记录并计算质壁分离的情况。找出引起 50% 以上的细胞发生初始质壁分离（即原生 质刚刚从细胞壁的角隅处与细胞壁分离）的蔗糖溶液浓度，以及不足 50% 的细胞发生质壁分离或不产生质壁分离的蔗糖溶液浓度。

4. 重新配制上述结果两种浓度的蔗糖溶液，用新的表皮重复实验 1~2 次，直到实验结果符合要求。这两种蔗糖溶液渗透势的平均值即为细胞液的渗透势。

5. 结果计算

根据 ψ_s = -ibRT 计算植物细胞的渗透势。

1.撕下的表皮组织必须完全浸没于蔗糖溶液中，浸没时间不能过短，否则会影响实验结果。

2.选用有色素的洋葱鳞茎外表皮实验效果较好。