荧光法检测种子实验

植物种子经常存在许多能够在紫外线照射下产生荧光的物质，如某些黄酮类，香豆素类、酚类物质等，在种子衰老过程中，这些荧光物质的结构和成分往往发生变化，因而荧光的颜色也相应改变，有些种子在衰老死亡时荧光物质的性质虽未改变，但由于生活力衰退或已死亡的细胞原生质透性加大，浸种时种子中的荧光物质很容易外渗。前一种情况可以用直接观察种胚荧光的方法确定种子生活力，后一种情况则可通过观察荧光物质渗出的多少来确定生活力。

植物种子
紫外线荧光灯 不产生荧光的白纸 刀片 镊子

一、材料、仪器设备

1. 材料：植物种子。

2. 仪器设备：紫外线荧光灯，不产生荧光的白纸，刀片，镊子。

二、实验步骤

1. 直接观察法

此法适用于一些松柏类，禾谷类及某些蔷薇科果树种子，但种间差异较大。用刀片沿胚的中心线将种子纵切成两半，取一半放在不产生荧光的白纸上，使种子的切面朝上，放在紫外线荧光灯下照射并进行观察，记载。有生活力的种子产生明亮的兰色、兰紫色、紫色或兰绿色的荧光，死种子多半是黄色、褐色以至暗淡无光，并带有多数斑点。

观察100粒种子，记下有生活力和丧失生活力种子数量，估计出发芽率，并与普通发芽实验法得到的实际发芽率相对照。

2. 纸上荧光团法

把浸泡过的完整无损的种子，按一定距离放在湿滤纸上（注意，滤纸上的水分不可过多，防止荧光物质流散）搁置一定时间（几小时）后，使滤纸（或连种子一起）风干，放在紫外荧光灯下照射，可以看到死种子周围有一圈明亮的荧光团。根据荧光团的数目就可以确定死种子的数目，每次至少测定100粒种子，并估计发芽率，与普通发芽试验法测得的实际发芽率相对照。这个方法应用在白菜、萝卜等十字花科植物种子上，效果很好。但对于衰老死亡后会减弱荧光或失去荧光的种子不适用，对于后一种情况应采用直接观察法。