原理
在植物中广泛存在细胞分裂素。它能促进细胞分裂,抑制核酸酶,蛋白酶等一些水解酶的活性,使大分子物质少受破坏。用细胞分裂素处理正在衰老的叶片,能阻止叶绿素的破坏,延长叶片寿命。
把植物的离体叶片放在适宜浓度的细胞分裂素溶液中,置于25-30℃黑暗条件下,叶片中叶绿素的分解比对照慢,证明分裂素具有保绿作用。
把植物的离体叶片放在适宜浓度的细胞分裂素溶液中,置于25-30℃黑暗条件下,叶片中叶绿素的分解比对照慢,证明分裂素具有保绿作用。
材料与仪器
小麦幼苗
激动素溶液 丙酮
培养皿 量筒 量筒 药物天平 小漏斗 小剪刀 容量瓶 研钵 滤纸 721分光光度计
激动素溶液 丙酮
培养皿 量筒 量筒 药物天平 小漏斗 小剪刀 容量瓶 研钵 滤纸 721分光光度计
步骤
一、材料与设备
小麦幼苗
直径8cm 培养皿,10 ml 量筒,100 ml 量筒,药物天平,小漏斗,小剪刀,25 ml 容量瓶,研钵,滤纸,721分光光度计
药品
100pp M 激动素溶液:10毫克激动素用少量0.1N HCl溶解,用蒸馏水定容至100 ml 。
丙酮,0.1NHCl,80%g丙酮。
二、实验步骤
1.在7个培养皿中分别加入蒸馏水和0.05pp M ,0.5pp M ,5pp M ,50pp M 的激动素溶液各10 ml 。每一处理重复3次。
2.选生长一致的小麦幼苗,剪下第一完全叶,切去尖端1.5cm ,取其后3cm 长的切断。向每一培养皿放进此切断0.500-1.000克。然后将培养皿放在散射光下培养1-2周。
3.从培养皿中取出小麦叶片,用滤纸吸干水分,放入研钵中。再向研钵中放入少量石英砂,少量碳酸钙以及4-5 ml 80%丙酮,仔细研磨成浆,过滤到100 ml 容量瓶中,研钵用80%丙酮4-5 ml 洗两次,洗出液过滤。滤渣和滤纸再放入研钵中,研磨,过滤。如此反复,直到滤出液无绿色。滤液用80%丙酮定容至100 ml 。
4.将721分光光度计灵敏度转在3的位置,以80%丙酮为空白对照,在663n M 和645n M 处比色。
三、结果
叶绿素浓度按下式计算:
〔ch1〕=20.2×D645+8.02×D663
〔ch1〕=叶绿素浓度,单位 M g/升。
D645:叶绿素溶液在645n M 处的消光值。
D663:叶绿素溶液在663n M 处的消光值。
小麦幼苗
直径8cm 培养皿,10 ml 量筒,100 ml 量筒,药物天平,小漏斗,小剪刀,25 ml 容量瓶,研钵,滤纸,721分光光度计
药品
100pp M 激动素溶液:10毫克激动素用少量0.1N HCl溶解,用蒸馏水定容至100 ml 。
丙酮,0.1NHCl,80%g丙酮。
二、实验步骤
1.在7个培养皿中分别加入蒸馏水和0.05pp M ,0.5pp M ,5pp M ,50pp M 的激动素溶液各10 ml 。每一处理重复3次。
2.选生长一致的小麦幼苗,剪下第一完全叶,切去尖端1.5cm ,取其后3cm 长的切断。向每一培养皿放进此切断0.500-1.000克。然后将培养皿放在散射光下培养1-2周。
3.从培养皿中取出小麦叶片,用滤纸吸干水分,放入研钵中。再向研钵中放入少量石英砂,少量碳酸钙以及4-5 ml 80%丙酮,仔细研磨成浆,过滤到100 ml 容量瓶中,研钵用80%丙酮4-5 ml 洗两次,洗出液过滤。滤渣和滤纸再放入研钵中,研磨,过滤。如此反复,直到滤出液无绿色。滤液用80%丙酮定容至100 ml 。
4.将721分光光度计灵敏度转在3的位置,以80%丙酮为空白对照,在663n M 和645n M 处比色。
三、结果
叶绿素浓度按下式计算:
〔ch1〕=20.2×D645+8.02×D663
〔ch1〕=叶绿素浓度,单位 M g/升。
D645:叶绿素溶液在645n M 处的消光值。
D663:叶绿素溶液在663n M 处的消光值。
来源:丁香实验