玻片凝集法
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原理
人类ABO 血型抗原有A 和B 两种。A 型红细胞膜上有A 抗原,B 型红细胞膜上有B 抗原,AB 型有A 和B 两种抗原,而O 型则不含有A 和B 抗原。抗A,抗B分型试剂是分别针对A 抗原或B 抗原的特异性抗体。当将已知的抗A 或抗B 试剂与受检者红细胞混合时,抗A 和/或抗B 血清与红细胞表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集,根据其凝集状况便可判定受试者的血型。
材料与仪器
抗 A(标记红色) 抗 B(标记绿色)标准血清 生理盐水
载玻片 采血针 特种铅笔(记号笔) 点眼棒(牙签) 75% 酒精棉球 无菌干棉球 毛细吸管 光学显微镜
载玻片 采血针 特种铅笔(记号笔) 点眼棒(牙签) 75% 酒精棉球 无菌干棉球 毛细吸管 光学显微镜
步骤
1. 取载玻片一张,用特种铅笔分为两格,注明A,B字样。
2. 将抗A血清,抗B血清各一滴分别滴于A,B格内。
3. 用酒精棉球消毒无名指指端皮肤或耳垂,待酒精干后,再用无菌采血针刺破表皮,用毛细吸管取血一滴,放入盛有l ml 生理盐水的试管中,混匀,即成待检红细胞悬液(约2%)。
4. 用毛细吸管取受检者红细胞悬液于抗A 和抗B 格内各加一滴,然后分别用点眼棒(牙签)将抗血清与红细胞搅拌均匀(也可轻轻晃动载玻片以促其充分混匀),以加速其反应。将玻片放置于实验台上静置数分钟后,在白色背景下观察凝集情况。如肉眼观察不够清楚,可将玻片置于显微镜下用低倍镜观察。
[结果观察]
如混合液由均匀红色混浊状逐渐变为透明,并出现大小不等的红色凝集块者即为红细胞凝集,若混合液仍呈均匀混浊状,则表明红细胞未发生凝集。
2. 将抗A血清,抗B血清各一滴分别滴于A,B格内。
3. 用酒精棉球消毒无名指指端皮肤或耳垂,待酒精干后,再用无菌采血针刺破表皮,用毛细吸管取血一滴,放入盛有l ml 生理盐水的试管中,混匀,即成待检红细胞悬液(约2%)。
4. 用毛细吸管取受检者红细胞悬液于抗A 和抗B 格内各加一滴,然后分别用点眼棒(牙签)将抗血清与红细胞搅拌均匀(也可轻轻晃动载玻片以促其充分混匀),以加速其反应。将玻片放置于实验台上静置数分钟后,在白色背景下观察凝集情况。如肉眼观察不够清楚,可将玻片置于显微镜下用低倍镜观察。
[结果观察]
如混合液由均匀红色混浊状逐渐变为透明,并出现大小不等的红色凝集块者即为红细胞凝集,若混合液仍呈均匀混浊状,则表明红细胞未发生凝集。
来源:丁香实验