材料与仪器
步骤
1. 以维持液(0.5% 水解乳蛋白Hank's 液)将病毒作连续10 倍稀释(每一稀释度换一新吸管)。
2. 如选择滴定的稀释度为l0-6~10-8,则于试管架上排列8 支试管。l0-1~10-5共5 支管,每管如入1.8 毫升维持液;l0-6~10-8共3 管,每支加入4.5 毫升维持液。用吸管吸0.2 毫升病毒原液于第1管,再用新吸管吹打,取出0.2 毫升到第2 管,按此法连续稀释到第5 管。从第5 管起吸出0.5 毫升到第6 管,用新吸管吹打取出0.5 毫升到第7 管;同时用同一吸取取出10-8 病毒液1 毫升,接种细胞管,每稀释度接种4 管,以下方法类推。
3. 接种后根据病变出现的快慢,连续观察几天。
4. 细胞管的半数发生病变现象的稀释度,即为50%感染单位(称TCID50)
2. 如选择滴定的稀释度为l0-6~10-8,则于试管架上排列8 支试管。l0-1~10-5共5 支管,每管如入1.8 毫升维持液;l0-6~10-8共3 管,每支加入4.5 毫升维持液。用吸管吸0.2 毫升病毒原液于第1管,再用新吸管吹打,取出0.2 毫升到第2 管,按此法连续稀释到第5 管。从第5 管起吸出0.5 毫升到第6 管,用新吸管吹打取出0.5 毫升到第7 管;同时用同一吸取取出10-8 病毒液1 毫升,接种细胞管,每稀释度接种4 管,以下方法类推。
3. 接种后根据病变出现的快慢,连续观察几天。
4. 细胞管的半数发生病变现象的稀释度,即为50%感染单位(称TCID50)
来源:丁香实验