原理
材料与仪器
小动物实验台 注射器 酒精
步骤
1、剪尾采血:需血量较少时常用此法。先将动物固定,将鼠尾浸在50℃左右温水中浸泡几分钟或用酒精棉球或二甲苯涂擦鼠尾,使尾部血管充盈,剪去尾尖1~2mm(小鼠)或3~5mm(大鼠),便血液顺血管壁自由流入试管或用血红蛋白吸管吸取。采血结束时,伤口消毒并用棉球压迫止血。此法每只鼠一般可采血10次以上,小鼠每次可取血0.1mL左右,大鼠可取血0.3~0.5ml。
2、眶后静脉丛采血:操作者一手固定小鼠或大鼠,拇指和食指尽量将鼠头部皮肤捏紧,或轻轻压迫颈部两侧,使鼠眼球突出,眶后静脉丛充血,另一只手持毛细采血管,以45°从内眼角刺入,并向下旋转,感觉刺入静脉丛后,再向外边退边吸,当得到所需血量后,放松加于颈部的压力,并拔出采血器,以防穿刺孔出血。若技术熟练,此方法在短斯内可重复采血,小鼠一次可采血0.2~0.3ml,大鼠可采血约0.5ml。如只进行一次取血,可采用摘眼球法,右手取一眼科弯镊,在鼠右或左侧眼球根部将眼球摘去,并将鼠倒置;头向下,抽取血液。
3、鼠装进固定器,漏出尾巴,同1,使尾部血管充盈,作好尾部消毒,用1 ml针筒接好4号针头,穿刺尾静脉,抽取血液。
4、腋下采血:将麻醉后的小鼠仰卧固定,剪开腋下皮肤,钝性分离腋下的胸肌等组织,暴露腋下血管,剪断腋下静脉,用注射器或吸管吸血。
5、断头采血:用剪刀迅速剪掉动物头部,立即将动物头朝下,提起动物,血液可流入试管中。
6、心脏采血:切开动物胸膛,直接从见到的心脏内采血,也可剪破心脏直接用注射器或吸管吸血。
7、股动脉采血:大量取血时常用此法。需手术分离股动脉,用注射器套上针头刺入血管取血或剪断股动脉用吸管吸取血样,小鼠的一次采血量可达0.5ml,大鼠可达2.0ml,操作时防止喷血。
注意事项
1. 防止毛絮进入血液导致溶血等。
2. 防止剧烈的晃动,一般采集后须静置,并离心收集血清(或血浆)。
3. 分离之前不可冷冻。分离之后的血清(浆)可视情况进行冻存处理。
来源:丁香实验