原理
显示人染色体过去主要取骨髓培养，利用其中干细胞能进行增殖显示染色体。末梢血淋巴细胞是已发生分化、处于功能态（G0 期）和无分裂活动的细胞。
但在PHA的诱导下，T淋巴细胞可重新进入增殖态发生细胞分裂。
为获得淋巴细胞可用多量血分离（10 ml）和微量全血培养两种方法。
多量血法较繁锁已少用，用微量全血培养法效果与多量血相同。每次从被检者静脉或指尖、耳垂等处仅采少量血（0.5 ml～2 ml），即可够做数个样品的培养，从而极大简化了观察人染色体的方法。
但在PHA的诱导下，T淋巴细胞可重新进入增殖态发生细胞分裂。
为获得淋巴细胞可用多量血分离（10 ml）和微量全血培养两种方法。
多量血法较繁锁已少用，用微量全血培养法效果与多量血相同。每次从被检者静脉或指尖、耳垂等处仅采少量血（0.5 ml～2 ml），即可够做数个样品的培养，从而极大简化了观察人染色体的方法。
材料与仪器
培养液 秋水仙素 肝素
棉球 离心管 镊子 采血针 吸管
棉球 离心管 镊子 采血针 吸管
步骤
1. 培养液准备
取15 ml培养瓶数个，每瓶内分别充入5 ml培养液（pH 7.2），内含
PHA 0.1 ml
2. 抽血针管准备
取2～5 ml 针管一支，在消毒后的无菌操作台或无菌操作箱中安装好注射器，无菌抽肝素（100 U/ml BBS）少许湿润针管，如动作迅速不用肝素亦可；
3. 采血
用棉签沾75 %酒精给患者或献血者的皮肤消毒两次（勿用碘酒！），缚止血带，静脉取血1～2 ml，无菌操作迅速向每一瓶培养中加血0.4～0.5 ml；如系外出采血，安装针管及分装血液两步骤亦可在无菌条件略差的环境内操作，但动作要迅速，以减少污染；在采血量不多或不应抽血的情况下，亦可在耳垂、手指肚（无名指）用刺血针采血；
4. 培养和加秋水仙素
37 ℃温箱中培养到第60～72 小时之间，此时细胞分裂相最多，向每培养瓶内加秋水仙素，最终浓度0.02～0.08 μg/ml营养液，再培养4～6 小时；
5. 低渗
1000 转/分钟，离心10 分钟后，吸除上清液，加入预温过的0.075 M KCl溶液10 ml，置温箱中低渗处理15～20 分钟；
6. 其余步骤与处理传代细胞法相同。
取15 ml培养瓶数个，每瓶内分别充入5 ml培养液（pH 7.2），内含
1640 培养液（含10 %～15 %小牛血清）
PHA 0.1 ml
青霉素100 单位和链霉素100 μg/ml 培养液
2. 抽血针管准备
取2～5 ml 针管一支，在消毒后的无菌操作台或无菌操作箱中安装好注射器，无菌抽肝素（100 U/ml BBS）少许湿润针管，如动作迅速不用肝素亦可；
3. 采血
用棉签沾75 %酒精给患者或献血者的皮肤消毒两次（勿用碘酒！），缚止血带，静脉取血1～2 ml，无菌操作迅速向每一瓶培养中加血0.4～0.5 ml；如系外出采血，安装针管及分装血液两步骤亦可在无菌条件略差的环境内操作，但动作要迅速，以减少污染；在采血量不多或不应抽血的情况下，亦可在耳垂、手指肚（无名指）用刺血针采血；
4. 培养和加秋水仙素
37 ℃温箱中培养到第60～72 小时之间，此时细胞分裂相最多，向每培养瓶内加秋水仙素，最终浓度0.02～0.08 μg/ml营养液，再培养4～6 小时；
5. 低渗
1000 转/分钟，离心10 分钟后，吸除上清液，加入预温过的0.075 M KCl溶液10 ml，置温箱中低渗处理15～20 分钟；
6. 其余步骤与处理传代细胞法相同。
来源：丁香实验
