原理
在间期细胞核中,女性X染色质和男性Y染色质均可用特殊染色法显示出来。
女性的两个X染色体中的一个,在间期时的染色质呈异固缩(Heteropyconosis),呈深染的小体称Barr氏体。Barr氏体位于间期细胞核内面,呈三角形或半月形小体,易为碳酸复红或硫堇等染料着色。正常女性Barr氏体阳性,男性为阴性。
男性Y染色质位于间期细胞核近中央部,易为盐酸阿的平着色,荧光显微镜下观察发较强荧光,呈点状小体,发光部分系Y染色体异固缩的长臂。初代培养细胞和二倍体细胞株均可观察到性染色质,传代细胞系表现不规律。
女性的两个X染色体中的一个,在间期时的染色质呈异固缩(Heteropyconosis),呈深染的小体称Barr氏体。Barr氏体位于间期细胞核内面,呈三角形或半月形小体,易为碳酸复红或硫堇等染料着色。正常女性Barr氏体阳性,男性为阴性。
男性Y染色质位于间期细胞核近中央部,易为盐酸阿的平着色,荧光显微镜下观察发较强荧光,呈点状小体,发光部分系Y染色体异固缩的长臂。初代培养细胞和二倍体细胞株均可观察到性染色质,传代细胞系表现不规律。
材料与仪器
Sorensen PBS Atebrine
步骤
一、染色步骤
1. 细胞
盖片培养细胞用37 ℃的BSS漂洗后,立即投入染色液内染色5~10 分钟(亦可先固定再染色);如用涂片标本则应待涂片干后,迅速投入96 %酒精固定10~15 分钟后再染色;
3. 脱水
通过纯酒精1 分钟;
4. 封片
二甲苯透明2~3 分钟,树胶封固。
二、结果
1. 细胞
盖片培养细胞用37 ℃的BSS漂洗后,立即投入染色液内染色5~10 分钟(亦可先固定再染色);如用涂片标本则应待涂片干后,迅速投入96 %酒精固定10~15 分钟后再染色;
2. 分化
用96 %酒精分化1 分钟,分化时要不断摇动,把片子上多余的染料漂洗掉;
用96 %酒精分化1 分钟,分化时要不断摇动,把片子上多余的染料漂洗掉;
3. 脱水
通过纯酒精1 分钟;
4. 封片
二甲苯透明2~3 分钟,树胶封固。
二、结果
在荧光显微镜下观察,Y染色质呈特别明亮黄绿色荧光圆点,直径0.25~0.3 微米,可位于核内任何位置,但以近中央时居多。
来源:丁香实验