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碳酸复红(Basic Fuchsin)显示X染色质法

相关实验:性染色质检测实验

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原理

在间期细胞核中,女性X染色质和男性Y染色质均可用特殊染色法显示出来。

性的两个X染色体中的一个,在间期时的染色质呈异固缩(Heteropyconosis),呈深染的小体称Barr氏体。Barr氏体位于间期细胞核内面,呈三角形或半月形小体,易为碳酸复红或硫堇等染料着色。正常女性Barr氏体阳性,男性为阴性。

男性Y染色质位于间
期细胞核近中央部,易为盐酸阿的平着色,荧光显微镜下观察发较强荧光,呈点状小体,发光部分系Y染色体异固缩的长臂。初代培养细胞和二倍体细胞株均可观察到性染色质,传代细胞系表现不规律。

材料与仪器

复红 乙醇 石碳酸 冰醋酸 甲醛

步骤

X染色质显示常用碳酸复红法和硫堇(Thionine)法。

一、染色步骤

1.  细胞

盖片培养细胞用37 ℃的BSS漂洗后,立即投入染色液内染色5~10 分
钟(亦可先固定再染色);如用涂片标本则应待涂片干后,迅速投入96 %酒精固定10~15 分钟后再染色;
 
2.  分化

用96 %酒精分化1 分钟,分化时要不断摇动,把片子上多余的染料漂洗
掉;

3.  脱水

通过纯酒精1 分钟;

4.  封片

二甲苯透明2~3 分钟,树胶封固。

二、结果

细胞质不着色,细胞核染成紫红色;阳性Barr氏体附于细胞核膜内面呈
三角形或半月形小体。

来源:丁香实验

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