原理
牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35 g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白的混合物，等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调到4.7时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。
材料与仪器
牛乳
乙醇 无水乙醚 醋酸 醋酸钠 乙醇 乙醚
离心机 抽滤装置 精密pH 试纸或酸度计 电炉 烧杯 温度计
乙醇 无水乙醚 醋酸 醋酸钠 乙醇 乙醚
离心机 抽滤装置 精密pH 试纸或酸度计 电炉 烧杯 温度计
步骤
1. 将100 ml牛乳放到500 ml烧杯中，加热到40 ℃，在搅拌下慢慢地加入预热到40 ℃、pH 4.7的醋酸-醋酸钠缓冲液100 ml。用精密pH试纸或酸度计调pH至4.7。将上述悬乳液冷却至室温，离心(3000 r/min)10 min，弃去上清液，或4层纱布过滤，得酪蛋白粗制品。
2. 用少量水洗沉淀3次，离心(3000 r/min)10 min，弃去上清液。
3. 在沉淀中加入30 ml乙醇，搅拌片刻，将全部悬乳液转移至布氏漏斗中抽滤，用乙醇-乙醚混合液洗沉淀2次，最后用乙醚洗沉淀2次，抽干。
4. 取出沉淀，摊开在表面皿上去除乙醚，干燥后得酪蛋白纯品。称重量，计算百分含量。
2. 用少量水洗沉淀3次，离心(3000 r/min)10 min，弃去上清液。
3. 在沉淀中加入30 ml乙醇，搅拌片刻，将全部悬乳液转移至布氏漏斗中抽滤，用乙醇-乙醚混合液洗沉淀2次，最后用乙醚洗沉淀2次，抽干。
4. 取出沉淀，摊开在表面皿上去除乙醚，干燥后得酪蛋白纯品。称重量，计算百分含量。
常见问题
1 . 为什么酪蛋白可在等电点pH 下沉淀下来?
2 . 为什么可以用有机溶剂洗涤蛋白质沉淀?
2 . 为什么可以用有机溶剂洗涤蛋白质沉淀?
来源：丁香实验
