原理
磺胺类药物能与某些试剂发生反应生成有色物质,通过比色可以对其血浓度进行定量检测。酸性环境下,磺胺类药物苯环上的氨基(-NH2)离子化生成铵类(-NH3+)化合物,与亚硝酸钠发生重氮化反应,生成重氮盐(-N=N+-)。这种化合物在525 nm波长下比色,其光密度与磺胺类药物的浓度呈正比。
药代动力学:研究药物在体内转运和转化的动力学规律。通过观察用药后血药浓度的变化(时量曲线),研究药物从血浆中消除的速率,并以房室模型描述其规律,指导临床用药、调整用药剂量和给药间隔时间。
药代动力学:研究药物在体内转运和转化的动力学规律。通过观察用药后血药浓度的变化(时量曲线),研究药物从血浆中消除的速率,并以房室模型描述其规律,指导临床用药、调整用药剂量和给药间隔时间。
材料与仪器
兔子
三氯醋酸 亚硝酸钠 麝香草酚 磺胺嘧啶
分光光度计
三氯醋酸 亚硝酸钠 麝香草酚 磺胺嘧啶
分光光度计
步骤
1. 麻醉,分离颈动脉。耳缘静脉注射肝素抗凝后,颈动脉插管,取动脉血备用。
2. 取血:先取空白动脉血。然后给家兔耳缘静脉注射磺胺嘧啶(SD,0.3 g),分别于注射后0、3、5、15、30、45、60、90 min 时取动脉血。
3. 测定血药浓度:严格按照下表中的顺序加药:
2. 取血:先取空白动脉血。然后给家兔耳缘静脉注射磺胺嘧啶(SD,0.3 g),分别于注射后0、3、5、15、30、45、60、90 min 时取动脉血。
3. 测定血药浓度:严格按照下表中的顺序加药:
根据标准管的药物浓度及其光密度值,可计算出样品管内的药物浓度。公式如下:
OD 样/OD 标 = C 样/C 标
将所测得的血药浓度值与时间通过计算机进行曲线拟合,得到药时曲线,表达公式如下:
Ct = Ae-αt + Be-βt
其中,
Ct:时间t后的血药浓度
A:分布开始时的血药浓度;
α:分布速率常数;
B:消除开始时的血药浓度;
β:消除速率常数。
在半对数坐标纸上以时间(t)为横坐标,实测的光密度值换算而得的血药浓度的对数为纵坐标,绘制时量曲线图。
OD 样/OD 标 = C 样/C 标
将所测得的血药浓度值与时间通过计算机进行曲线拟合,得到药时曲线,表达公式如下:
Ct = Ae-αt + Be-βt
其中,
Ct:时间t后的血药浓度
A:分布开始时的血药浓度;
α:分布速率常数;
B:消除开始时的血药浓度;
β:消除速率常数。
在半对数坐标纸上以时间(t)为横坐标,实测的光密度值换算而得的血药浓度的对数为纵坐标,绘制时量曲线图。
注意事项
1. 加取血样的吸量管为同一只,因此应先取空白血样,分别加到对照管和标准管中后,再从注射后90min 时的血样开始取起,然后是注射后60、45、30、15、5、3、0 min 的血样。
2. 每只试管内,先加三氯醋酸,再加入血样,加完血样后立即振荡,否则会很快发生凝固,影响结果的准确性。
3. 显色剂的顺序一定不能错:亚硝酸钠→麝香草酚。
4. SD的血药浓度单位为μg/ml。
来源:丁香实验