原理
水杨酸根与铁离子起反应,形成一种紫色络合物,根据紫色络合物的颜色进行比色得光密度,将光密度代入公式计算得半衰期。
材料与仪器
家兔
水杨酸钠溶液 三氯醋酸溶液 三氯化铁溶液 肝素溶液
试管 离心管 刻度吸管 注射器 721 型分光光度计 离心机 吸管架 酒精棉球 干棉花 竹签
水杨酸钠溶液 三氯醋酸溶液 三氯化铁溶液 肝素溶液
试管 离心管 刻度吸管 注射器 721 型分光光度计 离心机 吸管架 酒精棉球 干棉花 竹签
步骤
1. 取兔一只,称体重,用经0.5%肝素湿润过的注射器从兔心取血2 ml(作对照血样),然后从耳静脉注入10%水杨酸纳溶液1.5 m/kg(150 mg/kg)。
2. 注射药后5分钟和35 分钟再从心脏取血2ml,将上述三次抽的血分别放入三支预先装有7ml 三氯醋酸的离心管搅拌离心(1500 转/分)5 分钟,使血浆蛋白沉淀。
3. 准确吸取上清液各6 ml 分别置入试管内,每管加三氯化铁溶液0.6 ml(或12 滴)摇匀后即可显色。
4. 以药前管为对照,在分光光度计上,用波长510 nm,1 cm 光径比色皿进行比色,读给药后两管上清液的光密度(x1、x2)。
5. 根据下列公式求半衰期t =1/2
(x1、x2为药后两次血浓度的光密度,t为两次取血间隔时间)
注意事项
⒈ 心脏取血:将兔仰卧,以左手拇指在胸骨一侧,食指及中指于胸骨另侧固定心脏,在心尖搏动最明显处将针与胸壁垂直刺入胸腔,当持针手感到心脏搏动时,再稍刺入心脏,然后抽出血液。取血时,宜用7—8 号针头,针头直出直入,勿在胸腔内左右探索。
⒉ 为防止凝血,心脏取血时,注射器内先用0.5%肝素溶液湿润。
常见问题
一、测定药物的半衰期有何临床意义?
来源:丁香实验