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测定伤寒杆菌“O”抗体

相关实验:酶联免疫吸附(ELISA)测定伤寒杆菌“O”抗体实验

最新修订时间:

材料与仪器

伤寒杆菌
邻苯二胺 碳酸钠 碳酸氢钠 PBS 磷酸氢二钠 柠檬酸
聚乙烯塑料反应板 离心机 摇床 培养箱

步骤

1.  抗原包被
取洁净的聚苯乙烯微量反应板,于每孔内加伤寒抗原0.1毫升(用包被缓冲液稀释,蛋白含量10微克/毫升),置37℃1小时,弃抗原液,用洗涤液3次每次3分钟。

2.  加待测血清
于每孔内分别加不同稀释度(如1:5,1:10,1:20…1:80)的待测血清,PBS空白对照,阴性对照血清,阳性对照血清各0.1毫升。置37℃30分钟,洗涤3次。

3.  加酶联A蛋白
于每孔加酶联A蛋白各0.1毫升,置37℃20分钟,洗涤3次。

4.  加临时配制的底物溶液各0.1毫升,置暗处15分钟。加2M碳酸1滴终止反应。

5.  结果判断:(肉眼判断)
若颜色于阴性对照相同则为阴性,若较阴性对照深则为阳性,根据颜色深浅以(+)表示。

来源:丁香实验

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