大分子物质的水解

最新修订时间：2022-02-10

原理

水解过程可通过底物的变化来证明，如细菌水解淀粉的区域，用碘测定不再产生蓝色；水解明胶可观察到明胶被液化；脂肪水解后产生脂肪酸改变培养基的pH，其中的中性红指示剂使培养基从淡红色变为深红色。

材料与仪器

金黄色葡萄球菌枯草芽孢杆菌大肠杆菌绿脓杆菌
油脂培养基淀粉培养基明胶培养基卢戈氏碘液
无菌平皿接种环接种针

步骤

1. 油脂水解试验

（1）将溶化的油脂培养基冷至45℃左右时，充分振荡，使油脂均匀分布，用无菌操作倒入平皿中，待凝。

（2）将制成的平板用记号笔划成两半，一半接种金黄色葡萄球菌作为对照，另一半接种枯草芽孢杆菌作为试验菌，均用无菌操作画“+”接种。

（3）将接种的平板倒置于37℃温室中培养24小时。

（4）取出平板，观察平板底层长菌的地方，如出现红色斑点，说明脂肪被水解，为阳性反应。

2. 淀粉水解试验

（1）将淀粉培养基溶化后，冷至45℃左右，以无菌操作制成平板。

（2）用记号笔将平板划成两半，一半接种大肠杆菌作为试验菌，另一半接种枯草芽孢杆菌作为对照菌，均用无菌操作划线接种。

（3）将上述已接种的平板倒置于37℃温室中培养24小时。

（4）将已培养24小时的平皿取出，打开皿盖，滴加少量卢戈氏碘液于平板上，轻轻旋转平皿，使碘液均匀铺满整个平板。如菌苔周围出现无色透明圈，说明淀粉已
被水解。透明圈的大小、说明该菌水解淀粉能力的强弱。

3. 明胶液化试验

（1）取三管明胶培养基，用记号笔标明各管接种的菌名。分别以无菌操作用接种针穿刺接种大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、绿脓杆菌。

（2）接种后，置20℃温室中培养2~5天。

（3）观察明胶培养基液化情况。

4. 将结果填入下表。“+”表示阳性；“-”表示阴性。

来源：丁香实验