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原位裂解细胞的CAT分析法

相关实验:报道基因活性的同位素分析实验

最新修订时间:

材料与仪器

转染细胞
Triton裂解液
培养皿 培养箱

步骤

1.  60 mm 培养皿中转染了CAT表达质粒的细胞,用2 ml PBS洗1次。每培养皿加入2 ml 低渗缓冲液,在室温下温育2~5 min。

2.  吸去低渗缓冲液,加入400 μl Triton裂解液。用橡胶刮子将细胞刮离培养血,用1 000 μl 移液器将裂解物移入1.5  ml 微量离心管中。

3.  微量离心1 min 除去细胞核,不可溶性蛋白。将上清转入一个干净的微量离心管中, 进行CAT活性分析。
 

来源:丁香实验

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