原理
血红蛋白具有类过氧化物酶活性,可催化H2O2释放新生态氧,使邻甲联苯胺氧化发生颜色变化,由无色最终变为蓝紫色。根据显色深浅与标准进行比较,可测出其含量。
材料与仪器
静脉血样品
邻甲联苯胺溶液 H2O2 醋酸溶液 枸橼酸钠
分光光度计 离心机
邻甲联苯胺溶液 H2O2 醋酸溶液 枸橼酸钠
分光光度计 离心机
步骤
1.抽取静脉血2-3ml,枸橼酸钠抗凝,离心分离血浆。
2、用分光光度计,波长为530nm,以空白管调零,测定测定管的吸光度。
3.计算公式
血浆游离Hb(mg/L)=测定管吸光度/标准管吸光度×100
实验结果计算
参考范围:0-40mg/L
注意事项
1.一切容器避免血红蛋白污染;
2.采血要顺利,器皿要干燥,检测血浆要新鲜,及时分离,防止人为溶血;
3.邻联苯胺溶液具致癌性,检测时要小心,废液要妥善处理,以免污染;
4.双氧水要新鲜配置,浓度要准确。
常见问题
实验结果计算
参考范围:0-40mg/L
来源:丁香实验