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Masson 染色

相关实验:Masson染色

最新修订时间:

材料与仪器

试剂:

1、Regaud 氏苏木精:苏木精 1 g,95% 酒精 10 ml,甘油 10 ml,蒸馏水 80 ml。将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用;

2、Masson 丽春红酸性复红液: 丽春红 0.7 g,酸性复红 0.3 g,蒸馏水 99 ml,冰醋酸 1 ml;

3、0.2% 冰醋酸水溶液: 冰醋酸 0.2 ml,蒸馏水 100 ml;

4、1% 磷钼酸水溶液:磷钼酸 1 g,蒸馏水 100 ml;

5、 苯胺蓝水溶液:苯胺蓝 2 g,蒸馏水 98 ml,冰醋酸 2 ml;

6、1% 光绿水溶液:光绿 1 g,蒸馏水 100 ml。

步骤

1、石蜡切片脱蜡至水。

2、铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略)。其步骤如下:

(1) 切片脱蜡后于 0.5% 碘酒精作用 10 分钟。

(2) 稍水洗

(3) 5% 硫代硫酸钠作用 5 分钟。

(4) 流水冲洗 10 分钟

3、依次自来水和蒸馏水洗。

4、用 Regaud 苏木精染液或 Weigert 苏木精液染核 5~10 min。

5、充分水洗,如过染可盐酸酒精分化。

6、蒸馏水洗。

7、用 Masson 丽春红酸性复红液 5~10 min。

8、以 2% 冰醋酸水溶液浸洗片刻。

9、1% 磷钼酸水溶液分化 3~5 min。

10、不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染 5 min。

11、以 0.2% 冰醋酸水溶液浸洗片刻。

12、95% 酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固。

注意事项

1、控制好染色步骤。

2、组织固定起着很重要的作用,根据不同的固定液可延长或缩短染色时间。

3、0.2% 冰醋酸水溶液洗,可使色调清晰鲜艳。

4、磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用,分化时镜下控制, 肌纤维和纤维素呈红色,胶原纤维呈淡粉红色即可。

来源:丁香实验

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