材料与仪器
试剂:
1、Regaud 氏苏木精:苏木精 1 g,95% 酒精 10 ml,甘油 10 ml,蒸馏水 80 ml。将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用;
2、Masson 丽春红酸性复红液: 丽春红 0.7 g,酸性复红 0.3 g,蒸馏水 99 ml,冰醋酸 1 ml;
3、0.2% 冰醋酸水溶液: 冰醋酸 0.2 ml,蒸馏水 100 ml;
4、1% 磷钼酸水溶液:磷钼酸 1 g,蒸馏水 100 ml;
5、 苯胺蓝水溶液:苯胺蓝 2 g,蒸馏水 98 ml,冰醋酸 2 ml;
6、1% 光绿水溶液:光绿 1 g,蒸馏水 100 ml。
步骤
1、石蜡切片脱蜡至水。
2、铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略)。其步骤如下:
(1) 切片脱蜡后于 0.5% 碘酒精作用 10 分钟。
(2) 稍水洗
(3) 5% 硫代硫酸钠作用 5 分钟。
(4) 流水冲洗 10 分钟
3、依次自来水和蒸馏水洗。
4、用 Regaud 苏木精染液或 Weigert 苏木精液染核 5~10 min。
5、充分水洗,如过染可盐酸酒精分化。
6、蒸馏水洗。
7、用 Masson 丽春红酸性复红液 5~10 min。
8、以 2% 冰醋酸水溶液浸洗片刻。
9、1% 磷钼酸水溶液分化 3~5 min。
10、不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染 5 min。
11、以 0.2% 冰醋酸水溶液浸洗片刻。
12、95% 酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固。
注意事项
1、控制好染色步骤。
2、组织固定起着很重要的作用,根据不同的固定液可延长或缩短染色时间。
3、0.2% 冰醋酸水溶液洗,可使色调清晰鲜艳。
4、磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用,分化时镜下控制, 肌纤维和纤维素呈红色,胶原纤维呈淡粉红色即可。
来源:丁香实验