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叶绿体色素的提取、分离和理化性质观察

实验分类:

植物学实验

最新修订时间:

简介

叶绿体色素有吸收、传递和转化光能的作用,提取与分离叶绿体色素是研究光合色素特性的第一步,学习与了解这些光合色素的性质有助于认识和探究其在光合作用中的功能,通过本实验掌握叶绿体色素的提取分离方法及叶绿素的一些理化性质。

原理

叶绿体色素的提取、分离和理化性质观察的基本原理是叶绿体色素主要由叶绿素 a、叶绿素 b、胡萝卜素和叶黄素组成。它们与类囊体膜相结合成为色素蛋白复合体。这两类色素都不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用乙醇、丙酮等有机溶剂提取。提取液可用色谱分析的原理加以分离。因吸附剂对不同物质的吸附力不同,当用适当的溶剂推动时,混合物中各种成分在两相(固定相和流动相)间具有不同的分配系数,所以移动速度不同,经过一定时间后,可将各种色素分开。叶绿素与类胡萝卜素都具有特异的吸收光谱,可用分光光度计精确测定。

叶绿素荧光现象:当叶绿素分子吸收光量子而转变成激发态时,分子很不稳定,当它变回到基态时发射出红光量子,称为荧光现象。所以,透射光下观察浓叶绿体色素提取液呈绿色,反射光观察浓叶绿体色素提取液呈红色。

叶绿素是一种二梭酸——叶绿酸与甲醇和叶绿醇形成的复杂酯,因而可与碱发生皂化作用,产生的盐可溶于水中,利用此法可将叶绿素与类胡萝卜素分开。

叶绿素分子中的镁可被 H+ 所取代而形成褐色的去镁叶绿素。后者遇铜形成的绿色的铜代叶绿素很稳定,在光下不易被破坏,故常用此法制作标本;叶绿素分子的化学性质也很不稳定,易受强光破坏,特别是当叶绿素与蛋白质分离后,破坏更快。

来源:丁香实验团队

操作方法

叶绿体色素的提取、分离和理化性质观察

叶绿体色素有吸收、传递和转化光能的作用,提取与分离叶绿体色素是研究光合色素特性的第一步,学习与了解这些光合色素的性质有助于认识和探究其在光合作用中的功能,通过本实验掌握叶绿体色素的提取分离方法及叶绿素的一些理化性质。

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