紫花苜蓿茎细胞壁蛋白质提取实验

植物学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

植物细胞壁是植物细胞具有高动态和化学活性的组分。细胞壁主要成分是多糖类，以及约占细胞壁体积 10% 的蛋白质。这些蛋白质很难以高纯度从碳水化合物复合体基质中分离。基质不仅固着了蛋白质而且是后续 2-DE 分析的污染物。本实验来源「植物蛋白质组学实验指南」〔法〕H.蒂勒门特、M.齐维、C.达默韦尔、V.米琴主编。

来源：丁香实验

操作方法

紫花苜蓿茎细胞壁蛋白质提取

3.1 组织破碎、清洗、凝胶检测纯度 ( 1 ) 收集 7~8 g 成熟（节间 4~6 ) 紫花苜蓿茎。这一重量的成熟茎组织这一数量中含有的细胞壁的蛋白质应多于 1 mg ( 见注释 2) 。收集后 -80°C 贮存或立即进入下一步。 ( 2 ) 所有的溶液置于冰上。 ( 3 ) 把茎剪成小块，1~2 cm 的长度，使研磨更容易。 ( 4 ) 冻结的组织解冻（见注释 3) 。 ( 5 )