植物原位接种介导的小麦高效农杆菌转化方法实验

植物学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本章详细介绍了一种重复性好的农杆菌介导的春小麦转化方法，即通过将农杆菌菌液直接接种到小麦的未成熟种子中进行转化，该方法已申请专利 WOOO/63398[1]。其转化效率为 1%~30%，通常可获得至少 5% 的平均转化效率。转化获得的再生植株整体表现正常。本实验来源「麦类作物转基因技术与田间鉴定实验指南」〔英〕H.D.琼斯 P.R .休里主编。

来源：丁香实验

操作方法

植物原位接种介导的小麦高效农杆菌转化方法

一、材料 1. 母体植株的生长 ( 1 ) 将母体植株种植于 12 , 7F ( 直径为 13 cm) 的盆钵中，每盆 4 株。 ( 2 ) 用 Levingtons M2 培养土，并施用 5 g/L 奥绿专用缓释肥（15 : 9 : 9+ 3 MgO + TE；释放周期达 5~6 个月），并在介质表层铺一薄层蛭石。 ( 3 ) 用 Teku 植物支撑器（LBS Horticulture