植物 DNA 提取实验

1、CTAB 法 

CTAB法即十六烷基三乙基澳化按法，CTAB 是一种阳离子去污剂，它能与核酸形成复合物，这些复合物在低盐溶液中会因溶解度的降低而沉淀，而在高盐溶液中可解离，从而使 DNA 和多糖分开，再用乙醇沉淀 DNA 除去 CTAB。在该法中使用的聚维酮 (PVP) 与多酚结合形成复合物，从而可有效避免多酚类化合物影响 DNA 降解。

2、SDS 法

相比于 CTAB，SDS 法更加方便简单。近年来科研者们提出了利用 SDSTris-Cl-EDTA 直接裂解细胞使其释放出 DNA 的方法，后续的 DNA 纯化过程中通常采用酚/氯仿处理，但对于植物 DNA 纯化不是一个很好的选择，因为酚的使用可降低 DNA 的提取效率和纯度。实验证明，若采用较大的离心力和较长的离心时间，然后用氯仿一异戊醇代替酚来去除变性蛋白质，可以克服由于酚的掺入及残留对以后酶切带来的困难。 

此方法最大的特点是：将 SDS 同时用作细胞膜的去污剂和蛋白质的变性剂，变性的蛋白质通过离心而不是酚抽提除去，使得整个操作过程变得简单快捷，比较温和，1 小时左右就可以获得纯化的植物 DNA。用这种方法得到的 DNA 能直接被限制性内切酶酶解，纯度较高，适用于分子生物学的研究。

3、氯化节法

氯化节法的提取获得率较高。原因可能为氯化节不仅与植物细胞壁上的多糖经基反应生成醚，而且与细胞液中多糖物质的All基反应破坏糖链，有利于 DNA 的释放和提纯。 

4、高盐低pH法

高盐低 pH 法是指以无机盐和异丙烯为提纯试剂提取 DNA 的方法。通常采用的无机盐为低 pH 的醋酸钾，用来沉淀蛋白质。该方法方便省时，所需样品量少。 

5、果胶酶法

这是一种利用果胶酶对植物破碎细胞进行抽提的技术。