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植物细胞线粒体 DNA 的提取

实验分类:

遗传学实验

最新修订时间:

简介

在真核生物中,除核基因组外,还存在细胞质基因组,即线粒体基因组和绿色植物中的叶绿体基因组。线粒体基因组和叶绿体基因组均为环状分子,它们的大小随物种的不同而有所变化。


线粒体 DNA(mtDNA)的大小介于 200~2500kb 之间。细胞器基因组在遗传方式、基因组大小与结构、基因编码容量、基因表达与调控等方面均不同于核基因组,而且叶绿体、线粒体基因组又各具自身特点。


核、质基因组在功能上的相互协调,是细胞进行生命活动的重要基础。因此,研究细胞器基因组的结构与功能具有重要意义。在所有细胞器基因组的研究中,分离到纯化的细胞器 DNA 是极为关键的。

来源:《遗传学实验教程》

操作方法

基本方案

以下所有操作除特别指明外,均在4℃进行,将研钵、研棒和离心管预冷,使用冷藏的缓冲液并在冰桶中操作。1.剪取幼嫩叶片,用1%次氯酸钠溶液消毒15min,无菌水冲洗3次,再将其剪成约1cm2的碎片。2.按每克材料10ml研磨缓冲液的比例加入研磨缓冲液,在研钵中将叶片研磨成匀浆。用6层纱布过滤,并收集滤液。3.滤液于4℃,3000r/min离心15min,收集上清液。4.上清液于4℃,10000r/mi

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