冰冻切片免疫荧光

形态学与生理生化

最新修订时间：2022-02-10

简介

观察组织中目的蛋白的定位

原理

免疫荧光技术亦称荧光抗体技术，应用化学方法将荧光色素（主要是异硫氰酸荧光黄FITC）与抗体结合起来，即荧光抗体，这种结合荧光色素的抗体的免疫原性并不因此而发生改变。在特定条件下用荧光抗体染标本，如果标本中存在有相应的抗原，荧光抗体便与标本中的抗原发生特异性结合，在荧光显微镜的蓝紫光或紫外光照射下，标本中的抗原抗体复合物便发出特异的荧光，荧光的出现表明被检标本中特异抗原的存在。

应用

免疫染色

来源：丁香实验

操作方法

冰冻切片免疫荧光

1. 冰冻切片一般选择多聚赖氨酸黏附性载玻片，多聚赖氨酸处理载玻片是带强阳离子的，主要用于病理组织切片、液基细胞学涂片,作用是防止玻片掉片。冰冻切片之后如果不即时染色，可将片子放于负八十冰箱。再次取出后可先在室温晾干 15 分钟。然后置 PBS 中浸泡 10 分钟，以去除 OCT；2. 用组化油笔将待染组织圈好，目的是为了在进行后续孵育抗体时尽量缩小范围，使抗体进行有效的孵育；3. 0.5%Tri