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细胞荧光钙离子信号检测

实验分类:

细胞实验

最新修订时间:

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合作专家 | 孙齐博士

生理学 首都医科大学

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审核专家 | 李娜硕士

生理学 大连医科大学

简介

钙离子在很多生理活动中都发挥着重要作用,细胞荧光钙离子成像技术是利用钙离子指示剂将细胞内钙离子浓度变化转化为荧光信号,从而使细胞电活动转化为可记录的光信号的成像技术。

肠神经胶质细胞的活动与钙离子密切相关,利用钙离子指示剂监测神经胶质细胞的活动就显得尤为重要。钙离子荧光指示剂在未结合钙离子前几乎无荧光,与钙离子结合后,荧光强度显著增强。

来源:

操作方法

Fluo-4 AM 荧光钙离子成像

(1)提前一天将原代肠胶质细胞接种在共聚焦培养皿上;(2)第二天观察细胞状态良好后,弃去培养基,PBS 清洗三次;(3)加入适量的含有 5 μM Fluo-4 AM(Beyotime,S1060)的DMEM/F12 培养基,37 ℃ 孵育 30 min;(4)PBS 清洗,置于转盘共聚焦显微镜(UltraVIEW VoX,PerkinElmer)上观察(成像30~60 秒采集基础状态图像,添加相应

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