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简介
不同的氨基酸带有不同化学性质的侧链基团,有的带有碱性侧链,有的带有酸性侧链,这使由氨基酸组成的不同蛋白质拥有不同数目的碱性基团和酸性基团,这些基团会使蛋白质在不同的 pH 溶液中带有不同的净电荷。如在生理条件下,整个蛋白质分子所带负电荷多,则为酸性蛋白质;带正电荷多,则为碱性蛋白质。
因此,可将标本用酸处理提取出核酸后,用带负电荷的碱性染液固绿(pH8.2~8.5)染色,使在此 pH 环境中带正电荷的碱性蛋白被显示出来。
原理
细胞中碱性蛋白显示实验的基本原理是细胞中含量最为丰富的碱性蛋白是组蛋白,组蛋白与 DNA 紧密包裹形成的复合物称为染色质,它作为遗传信息的储存载体存在于真核细胞的细胞核中。组蛋白合成于细胞周期 S 期的细胞质中,合成后迅速由核孔转运进入核中完成与 DNA 的组装,因此,细胞中显示的碱性蛋白较多存在于细胞核中。
来源:丁香实验团队
操作方法
不同的氨基酸带有不同化学性质的侧链基团,有的带有碱性侧链,有的带有酸性侧链,这使由氨基酸组成的不同蛋白质拥有不同数目的碱性基团和酸性基团,这些基团会使蛋白质在不同的 pH 溶液中带有不同的净电荷。如在生理条件下,整个蛋白质分子所带负电荷多,则为酸性蛋白质;带正电荷多,则为碱性蛋白质。因此,可将标本用酸处理提取出核酸后,用带负电荷的碱性染液固绿(pH8.2~8.5)染色,使在此 pH 环境中带正电荷