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简介
微管是真核细胞普遍存在的结构。它是由 a、β 微管蛋白异二聚体和少量微管结合蛋白聚合而成的中空管状纤维。在不同类型的细胞中,微管具有相同的基本形态。微管中的单管在胞质内呈网状或束状分布;二联管构成纤毛、鞭毛的周围部分;三联管构成中心粒以及纤毛、鞭毛基体。观察微管可用电镜和免疫细胞化学技术,其中较常用的有间接免疫荧光法。
原理
间接免疫荧光技术显示胞质微管实验的基本原理是先用抗微管蛋白(tubulin)的免疫血清(一抗)与体外培养细胞一起温育,该抗体与细胞内微管特异结合,然后用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗兔(IgG)血清(二抗)与一抗温育而结合,从而使微管间接地标上荧光素。在荧光显微镜下,即可看到胞质内伸展的微管网络。间接免疫荧光法除灵敏性高外,它只需要制备一种种属间接荧光抗体,可以适用于多种第一抗体的标记显示,广泛应用于生物大分子的结构定位和形态显示。
来源:丁香实验团队
操作方法
微管是真核细胞普遍存在的结构。它是由 a、β 微管蛋白异二聚体和少量微管结合蛋白聚合而成的中空管状纤维。在不同类型的细胞中,微管具有相同的基本形态。微管中的单管在胞质内呈网状或束状分布;二联管构成纤毛、鞭毛的周围部分;三联管构成中心粒以及纤毛、鞭毛基体。观察微管可用电镜和免疫细胞化学技术,其中较常用的有间接免疫荧光法。