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脂肪来源干细胞 ASCs 的特征及分化实验

实验分类:

细胞实验

最新修订时间:

简介

在培养过程中,ASCs 可在很长时间内保持未分化状态。ASCs 具有成纤维细胞样形态,胞内缺乏脂肪细胞中所见的脂滴。体外扩增后,ASCs 的表型会发生改变,主要体现在细胞表面蛋白和细胞因子表达的变化。ASCs 的表型与骨髓和骨骼肌来源的干细胞相似。

免疫组化染色发现,诱导的 ASCs 可以表达神经细胞标志物,包括 NeuN、MAP2、tau、β-Ⅲ微管蛋白和 NSE, 可表达的神经胶质细胞标志物,包括胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、波形蛋白(Vimentin) 和 S100。但体外神经诱导的 ASCs 不表达少突胶质细胞的标志物 04。表达神经表型标志物的 ASCs 所占的比例相对较高,如表达 NeuN 的 ASCs 占诱导细胞的 80%。这种现象表明在这个异质细胞群体中,大部分细胞都或多或少有一定程度的神经分化。此外,一些细胞共表达 NeuN 和 GFAP, 提示至少在短期培养体系中,部分 ASCs 具有向神经细胞和神经胶质细胞分化的潜能。来源:《人干细胞培养》

来源:丁香实验

操作方法

脂肪干细胞的神经分化

(a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加入神经诱导培养基,将培养瓶放回温箱

脂肪干细胞的脂肪分化

(a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加入脂肪诱导培养基,将培养瓶放回温箱。(d)三天后,将诱导培养基更换成脂肪细胞生长培养。

脂肪干细胞的骨分化

(a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加人成骨诱导培养基,将培养瓶放回温箱。

脂肪干细胞的软骨分化

(a) 吸去培养基(b) 加人PBSA润洗细胞。(c) 加人成软骨诱导培养基,将培养瓶放回温箱

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