线粒体分离实验

1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞，转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中 RSB（使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液） 10 mmol/L NaCl 2.5 mol/L MgCl2 10 mmol/L Tris-HCl，pH 7.5 2. 让细胞膨胀 5~10 分钟。用相差显微镜监测膨胀过程。 3. 用研杵 B ( 小间隙型）研磨几下使膨胀细胞破碎。

1. 取出肝脏，注意不要弄破胆囊。放进一置于冰上的烧杯中，剪去任何结缔组织。称其质量后放回烧杯中。用锋利的剪刀、手术刀或剃须刀片将之切成 1~2 mmol/L 的薄片，用匀浆缓冲液（1x MS) 冲洗两次以去除大部分的血。转移至匀浆器中。加入足够的匀浆缓冲液，制备 1:10 的匀浆。 1 x MS（匀浆缓冲液） 210 mmol/L 甘露醇 70 mmol/L 蔗糖 5 mmol/L Tr

1. 在用于 Bockman SW28 号转头（或与其等同的产品）的 Uitradear 离心管中，小心地在 15 ml 1.5 mol/L 的蔗糖溶液上加一层 15 ml 1.5 mol/L 的蔗糖溶液，形成 30 ml 的梯度： 1.0 mol/L 蔗糖和 1.5 mol/L 蔗糖溶液中含： 10 mmol/L Tris-HCl ( pH 7.5) 1 mmol/L EDTA，pH 7.