从实体组织中制备粗微体实验

实验分类：

细胞实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

本实验来源「细胞实验指南」黄培堂等译。

来源：丁香实验

操作方法

从大鼠肝脏制备微体

1. 用断颈法杀死约 150 g 重的雄大鼠，大鼠的数量取决于要制备的粗微体的数量。由于一个 150 g 重的大鼠肝（6 g）大约每克肝蛋白含有 10 mg 粗微体，所以大鼠的数量可以以回收率为 50% 来进行估计。 2. 流干血液后，打开腹部和胸腔，切取肝，将它们放在盛有冰冷匀浆介质的烧杯中：匀浆介质（HM）： 0.5 mol/L 蔗糖 1 mmol/L DTT 3. 用冰冷 HM

从狗的胰脏中制备粗微体

1. 从动物身体切下胰脏，立即用大约 50 ml 冷 HM 缓冲液冲洗，放置于干净的纸巾上，去除结缔组织：匀浆介质（HM） 0.25 mol/L 蔗糖-缓冲液A 缓冲液A： 50 mmol/L 三乙基氨基乙酸缓冲液（TEA），pH 7.5 50 mmol/L KOAc 6 mmol/L Mg (0Ac)2 1 mmol/L EDTA 0.5 mmol/L PMSF 贮存液：