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淡水腹纤毛类的大量培养实验

实验分类:

细胞实验

最新修订时间:

简介

本实验来源「细胞实验指南」 黄培堂 等译。

来源:丁香实验

操作方法

伸展绿梭藻的生长

1. 制备无菌藻类培养基。 2. 在带金属帽装有 25 ml 藻类培养基的 18 mm X 150 mm 的试管中接种绿梭藻。从原种或绿梭藻培养皿接种。 3.在植物生长光照下大约 1 周,最长不超过 2 周时,取出试管。用 0.5 ml 无菌培养物接种装有培养基的新试管。 4. 如大量培养藻类,可在矮形的用棉花/纱布塞或其他闭合物过滤空气交换的 Fembach 烧瓶或大的 Erlenmeye

绿梭藻的浓缩

1. 在 250 ml 的瓶中于室温下 250 g 低速离心藻类 5 分钟。 2. 用移液管在腹纤毛类培养基中重悬沉淀的藻类,至少加到瓶中一半,以便洗掉藻类中的所有有机培养基。 3. 再同上离心,重悬于盐培养基中,等分进培养皿中。 4. 一般 250 ml 浓的藻类培养物可作为一培养皿腹纤毛类的充足的食物。

培养淡水腹纤毛类

1. 用剃刀或别的刀具将容器的底部割下,尽可能多保留容器壁。 2. 尽可能多的切掉盖子的中央,但要保持盖子四周完整。 3. 切下比框架大 1~2 英寸的 Nitex 滤膜,以便于安装到框架上。

腹纤毛虫的浓缩

1. 用 45~55 μm 的 Nitex 过滤细胞,除去食物残渣。可用干酪包布代替,但细胞有阻塞的可能。 2. 将细胞注入浓缩装置中,轻轻地摇动或颠动滤膜,与底部的液体搅动,并始终与液体接触。 3. 当大部分液体除去后,用喷瓶将细胞从滤膜上洗下至烧杯中。 4. 一次连续浓缩约 2 L,直到细胞体积足够小。

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