大鼠神经元细胞的分离和培养实验

1. 杀死怀孕 18 天母鼠（常用过量 CO2 使其窒息），用无菌器械取出胚胎，放在无菌的培养皿中。 2. 取下胚胎的头，放在盛有 4 ml 不含 Ca2+ 和 Mg2+ 的平衡盐溶液（BSS）的培养皿中。 3. 从头颅骨上取下脑，放在 35 mm 培养皿中的 BSS 液滴上，培养皿中半装满 Paraplast（Sigma）。 4. 在显微镜下剥离脑膜，取下海马体，放在装有 BSS 的 35

一、盖玻片的预处理 1. 玻璃盖玻片放在瓷染色架上，用蒸馏水冲洗。 2. 架子放在玻璃容器中，浓硝酸泡 48 小时。 3. MilliQ 水漂洗盖玻片 1 小时，重复 3 次。 4. 200℃ 烤 8 小时灭菌盖玻片。 5. 在层流柜中将盖玻片放在 60 mm 培养皿，外边缘放两粒（1~2 mm 高）融化的无菌 Paraplast。颗粒的大小决定了盖玻片和培养皿单层神经胶质细胞间的分离程