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细胞增殖的密度限制实验

实验分类:

细胞实验

最新修订时间:

简介

肿瘤的培养细胞及体外转化的细胞,都能表现出生长控制的异常,例如,更髙的饱 和密度、在琼脂中形成集落以及均质细胞生长成汇合的单层。这些细胞系表现出 对血清浓度及生长因子的依赖性较低,通常具有更髙的克隆形成率。同时推测,细胞获 得一定程度的自主生长是由于癌基因的过度表达或抑制基因的缺失。生长控制通常是自 分泌式的,如细胞分泌促分裂素。为此,细胞通常具有受体或者表达受体,或其信号传 导处于永久激活或不受调控的阶段。虽然永生性并不意味着失去生长控制,但许多细胞 从永生性容易发展至异常生长,这多半是由于内在的永生性基因型的遗传不稳定性。

来源:动物细胞培养:基础技术指南第五版

来源:丁香实验

操作方法

细胞增殖的密度限制实验

一、材料 无菌 1. 准备用于传代的细胞 2. 生长培养基 3. 维持培养基(无血清或生长因子),含有 37KBq/ml(1uCi/ml)的 3 H-胸腺嘧啶脱氧核苷,74 GBq/mmol(2Ci/mmol) 4. D-PBSA 5. 25% 胰蛋白酶 6. 24 孔培养板,包括直径 13 mm 的盖玻片 7. 直径 9 cm 培养

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