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细菌的接合作用实验

实验分类:

微生物实验

最新修订时间:

简介

细菌的接合是指供体菌与受体菌的完整细胞经直接接触时供菌的 DNA 向受体菌单向传递给而产生基因重组的现象。大肠杆菌的接合配对是由致育因子( F 因子)的存在所决定的。没有 F 因子的细胞作为受体,称为 F-,含有 F+ 因子的细胞作为供体。 如果 F 因子是染色体外的细胞质遗传物质,这种细胞称为 F+。如果 F 因子整合到染色体上,这种细胞称为高频重组(Hfr,high-frequency recombination) 细胞,整合在染色体上的 F 因子有时也会通过不规则杂交而脱离染色体重新成为游离状态的 F 因子,但由于 F 因子在脱离染色体时往往会附带着一段染色体片段,这个染色体片段和 F 因子构成一个整体,随 F 因子一起复制,含有这种 F 因子的细胞叫作 F'。在 Hfr×F- 杂交中,F 因子上包括先导区在内的一部分 DNA 片段结合着染色体 DNA 向受体细胞转移,F 因子的大部分 DNA 处于转移染色体的末端。 而且转移过程中随时可以发生中断,因此接合后的 F- 细胞虽然接受了某些 Hfr 基因,但一般不可能接受 F 因子而成为 F状态。


来源:《微生物学实验(第三版)》

来源:丁香实验

操作方法

基本方案

1. 分别将供体菌和受体菌接种在 2 支盛有 5 ml LB 液的试管中。37℃ 振荡培养 12 h。2. 分别用不同的 1 ml 无菌吸管吸取 0.3 ml 供体菌培养液和 1 ml 受体菌培养液至同一无菌试管中。受体菌是过量的,这样可以保证毎一个供休菌有相同的机会和受体菌接。3. 用两只手掌轻轻搓转试管,使试管内供、受体菌混匀。动作要轻柔,使供体菌和受体菌充分接触,同时避免刚接触的配对又被分开

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