酵母细胞破碎实验

1. 培养并收集酵母菌细胞，在酵母消解酶缓冲液重悬菌体沉淀之前，测定压紧细胞的体积，以下所有步骤均在4℃进行。 2. 用1体积的玻璃珠破菌缓冲液重悬细胞。 3. 用2体积的玻璃珠破菌缓沖液与细胞混合，加4体积冰冷的酸洗玻璃珠。 4a. 当压紧的细胞休积＜10 ml，将细胞悬液转移至合适大小的带螺口的离心管中（悬液占离心管≤60%~70%的容积），于4℃以最大速度下振荡30~60 s，将管置

1. 酵母在YPD（或选择性）培养基中剧烈振荡下培养至对数中期。离心，弃上清，市售酵母糕可以用来代替培养细胞。 2. 在旋涡混合器上振荡细胞沉淀，使其形成粘稠的细胞糊，必要时，加入最少量的冰水使细胞糊能够倒出或舀出，如果使用酵母糕，用等体积的细胞和水混合使之形成粘稠的细胞糊。在后续步骤中细胞糊的操作应在冰浴中进行。 3. 拔出60 ml 注射器的活塞，用塞子塞住底部或者用Paraf