酵母菌RNA制备实验

1. 酵母细胞在10 ml 培养基中生长至指数中期（OD600=1.0）。 2. 将培养液转移到50 ml，离心管，于4℃，1 500 g 离心3 min。 3. 弃上清，菌体沉淀用1 ml 冰冷的水重悬，转移至一个干净的1.5 ml 微量离心管中， 4℃离心10 s，弃上清，继续步骤4。需要时，将离心管置于干冰上速冻。 4. 用400 μl TSE溶液重悬细胞沉

1. 培养并收集酵母菌细胞，冷冻细胞沉淀。 2. 用300 μl RNA缓冲液中重悬细胞沉淀。 3. 加1体积冷的酸洗玻璃珠（体积与约200 μl 水相等）、300 μl 的用RNA缓冲液平衡的25：24 ：1酚/氯仿/异戊醇，拧紧瓶盖，然后颠倒并上下振荡以保证珠子悬浮，在旋涡混合器上高速剧烈振荡2 min。 4. 室温下离心1 min，将200~250 μl 水（上）相

一、热酸酚方案（基本方案1） 1. TES及酸酚溶液的体积增加到4 ml。 2. 操作时使用50 ml 聚丙烯离心管。 3. 将得到大约10 mg RNA。 二、玻璃珠方案（备择方案1） 1. 将体积增加到15 ml RNA缓冲液10 ml 体枳玻璃珠，15 ml 酚/氯仿/异戊醇，及30 ml 无水乙醇在50 ml 一次性聚丙烯管中继续各步骤。 2.