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简介
利用特定标记蛋白比如绿色荧光蛋白(GFP)或 β-葡萄糖苷酸酶(GUS)标记目的蛋白,随后通过免疫荧光或者 GUS 染色检测其分布位置。
原理
目前最常用的是融合报告基因定位,将目的蛋白与荧光蛋白的 N 端或者 C 端融合,通过瞬时转化或稳定遗传转化技术,使该融合蛋白在受体细胞中表达,目的蛋白与荧光蛋白一起定位到目标细胞器。随后在共聚焦显微镜的激光照射下,融合蛋白会发出特定颜色的荧光,从而精确地定位目的蛋白质的位置。
来源:
操作方法
利用特定标记蛋白比如绿色荧光蛋白(GFP)或 β-葡萄糖苷酸酶(GUS)标记目的蛋白,随后通过免疫荧光或者 GUS 染色检测其分布位置。