神经系统免疫性疾病模型制作实验

实验分类：

生物化学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

来源：《神经生物学实用实验技术》第四军医大学出版社

来源：丁香实验

操作方法

实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型

(1)免疫原的制备MOG35-55片段，其氨基酸序列为MEVGWYRSPFSRVVHLYRNGK,由公司合成(2)免疫方案包括：①第一次免疫(Od)异氟醚吸入麻醉下，MOG35-55:FCA(1:1)混合液4ml,百日咳杆菌菌液：PBS(1:50)混合液0.2ml于足垫处皮下注射；②第二次免疫(7d) 异氟醚吸入麻醉下，MOG35-55:FCA(1:1)混合液4ml,百日咳杆菌菌液:PBS(1:5

实验性自身免疫性神经炎(EAN)模型

(1) 周围神经髓鞘的制备自牛脊神经根提取周围神经髓磷脂(bovine peripheral mylin,BPM):①取牛硬脊膜内神经根，-70℃冻存；②室温融溶，剪碎，与0.3M蔗糖溶液混合，使用组织高速离散器制成5%(w/v)组织匀浆；③离心管中加入0.5M蔗糖溶液，再加入0.3M蔗糖组织匀浆（比例1:1),96000g,离心60min; ④收获界面（乳白色中间层），加入蒸馏水悬浮，96000

实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)模型

(1)免疫原的制备人工合成加利福尼亚电幔AchR-a的146-162序列片段作为免疫原，其氨基酸序列为Ala-Ile-Phe-Lys-Ser-Tyr-Cys-Glu-Ile-Ile-Val-Thr-His-Phe-Pro-Phe-Asp。(2)模型制备程序为：①将合成多肽20µg溶解于100µL的PBS缓冲液中(pH7.2),并加入等量的CFA,充分混合，直到水溶液完全被油滴吸附；②皮下注射接种于