乙醇脱氢酶的测定实验

生物化学实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

根据酶的来源，有许多种的乙醇脱氢酶（ADH），通常使用的酶是由酵母或马的肝脏中提取出来的。它们的结构和专一性都截然不同。酵母的 ADH 展现出醇的高活性，它是一个相同四聚体的酶，相对分子质量约为 148 000。哺乳动物的乙醇脱氢酶是一个 Mr＝79000 的二聚体，并且比较偏好较高浓度的乙醇。该酶在低浓度的溶液中不稳定，因此必须加入 BSA 来保持其稳定性。

来源：《酶学实验手册》

来源：丁香实验

操作方法

还原反应测定

实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 的实验混合物0.02 ml ADH（0.02 IU）25 ℃ 时，于 340 nm 处吸收值降低。为了方便量化，经常使用 NADH 的吸收系数 ε340＝6.3×103 l/（mol·cm）。

氧化反应测定

实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml ADH 稀释溶液25℃ 时，于 340nm 处吸收值降低。NADH 的吸收系数 ε340＝6.3×103 l/（mol·cm）。